Определение эпителиальной природы клеток и уровня пролиферативной активности Ki‑67 в первичной культуре карциномы молочной железы

Аннотация

Введение. Несмотря на то, что иммуногистохимический метод получил наибольшее распространение в клинической практике, его использование при исследовании культур клеток невозможно, поэтому в качестве альтернативного метода используется экспрессия молекулярных маркеров на клеточном уровне — иммуноцитохимический метод. Цель исследования — изучить возможность первичной клеточной культуры сохранять пролиферативную способность и эпителиальную природу клеток на протяжении нескольких пассажей. Материал и методы. В работе описан случай получения первичной клеточной культуры карциномы молочной железы. Проведено исследование индекса клеточной пролиферации Кi‑67 и определение эпителиальной природы клеток. Результаты. При определении индекса клеточной пролиферации Ki‑67 была отмечена тенденция к увеличению данного индекса на втором пассаже. Максимально низкий уровень был отмечен на первом пассаже и составлял 8,9 % окрашенных клеток. Для определения возможности использования полученной культуры после процедуры криоконсервации было выполнено повторное исследование на оба белка на третьем пассаже. Полученные данные имеют статистически значимые различия по критерию Манна — Уитни и составляют для Ki‑67 27,3 % и 47,2 %, для экспрессии цитокератина — 75 % и 81 % соответственно. Обсуждение. При получении клеточной культуры уровень индекса клеточной пролиферации Ki‑67 соответствовал уровню изначального образца на первом пассаже. При дальнейших пересевах клетки культуры демонстрировали высокий индекс, что свидетельствует о высоком уровне пролиферативных процессов и может быть связан с особенностями рецепторного аппарата клеток. Уровень цитокератина свидетельствует об эпителиальной природе опухоли, что необходимо учитывать при разного рода молекулярных исследованиях эпителиальных клеток in vitro. Выводы. Первичная культура карциномы молочной железы в ходе культивирования сохраняет преимущественно эпителиальную природу на протяжении трех пассажей и после криоконсервации. Индекс клеточной пролиферации Ki‑67 меняется при пересевах культуры.